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目的 探讨倍半萜烯内酯类衍生物(ACT001)对U87-MG胶质瘤干细胞(GSCs)的成球能力及干性维持的影响.方法 应用生物信息学分析CGGA、TCGA和GEO(GSE4290、GSE16011)数据库中1 477例脑胶质瘤患者的信号转导和转录激活因子3(STAT3) mRNA与胶质瘤病理学级别及患者总生存期之间的关系.免疫磁珠法分选获得U87-MG细胞株CD133阳性的GSCs.CCK-8细胞增殖-毒性检测ACT001对U87-MG GSCs增殖活性的影响.通过单细胞成球实验观察不同浓度的ACT001对U87-MG GSCs成球能力的影响.免疫荧光染色检测ACT001对U87-MG GSCs干性标志物CD133、CD44及Nestin表达的影响.蛋白质印迹法(Western blot)检测ACT001处理后STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、CD133及CD44等蛋白的表达.结果 生物信息学分析结果显示,随着脑胶质瘤级别的升高,STAT3 mRNA的表达量也逐渐升高(均P<0.05);而且STAT3高表达水平组的患者预后较差(均P<0.01);STAT3在神经球培养及干性细胞株的mRNA表达量较高(P<0.05).CCK-8细胞增殖-毒性检测结果提示,随着ACT001浓度的增高,U87-MG GSCs的抑制率逐渐升高.单细胞成球实验结果显示,随着ACT001药物浓度的升高,各组的成球数目及细胞球体积逐渐降低(P<0.01).免疫荧光染色结果显示,加药组的GSCs细胞球干性标志物CD133、CD44及Nesti

作者:李佳博;童鹿青;易立;刘沛东;解杨;王旭亚;杨学军

来源:中华神经外科杂志 2019 年 35卷 11期

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作者:
李佳博;童鹿青;易立;刘沛东;解杨;王旭亚;杨学军
来源:
中华神经外科杂志 2019 年 35卷 11期
标签:
神经胶质瘤 肿瘤干细胞 倍半萜烯内酯类衍生物 STAT3信号通路 Glioma Neoplastic stem cells Sesquiterpene lactone derivative STAT3 signaling pathway
目的 探讨倍半萜烯内酯类衍生物(ACT001)对U87-MG胶质瘤干细胞(GSCs)的成球能力及干性维持的影响.方法 应用生物信息学分析CGGA、TCGA和GEO(GSE4290、GSE16011)数据库中1 477例脑胶质瘤患者的信号转导和转录激活因子3(STAT3) mRNA与胶质瘤病理学级别及患者总生存期之间的关系.免疫磁珠法分选获得U87-MG细胞株CD133阳性的GSCs.CCK-8细胞增殖-毒性检测ACT001对U87-MG GSCs增殖活性的影响.通过单细胞成球实验观察不同浓度的ACT001对U87-MG GSCs成球能力的影响.免疫荧光染色检测ACT001对U87-MG GSCs干性标志物CD133、CD44及Nestin表达的影响.蛋白质印迹法(Western blot)检测ACT001处理后STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、CD133及CD44等蛋白的表达.结果 生物信息学分析结果显示,随着脑胶质瘤级别的升高,STAT3 mRNA的表达量也逐渐升高(均P<0.05);而且STAT3高表达水平组的患者预后较差(均P<0.01);STAT3在神经球培养及干性细胞株的mRNA表达量较高(P<0.05).CCK-8细胞增殖-毒性检测结果提示,随着ACT001浓度的增高,U87-MG GSCs的抑制率逐渐升高.单细胞成球实验结果显示,随着ACT001药物浓度的升高,各组的成球数目及细胞球体积逐渐降低(P<0.01).免疫荧光染色结果显示,加药组的GSCs细胞球干性标志物CD133、CD44及Nesti