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目的 探讨线粒体分裂抑制剂(mdivi-1)在脑缺血再灌注损伤中对能量代谢的影响.方法 将体外培养8d的Wistar大鼠海马神经元分为4组:正常对照组、赋形剂组、mdivi-1组、缺血再灌注损伤组,后两组利用海马神经元氧糖剥夺法建立缺血再灌注损伤模型,mdivi-1组建模前给予mdivi-1预处理40 min.缺血6h再灌注20 h后应用Western blotting检测各组海马神经元线粒体分裂蛋白1(Drp1)、B细胞淋巴癌/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平,应用流式细胞术检测线粒体膜电位,应用酶标仪法检测三磷酸腺苷(ATP)含量及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性以及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性. 结果 与正常对照组比较,mdivi-1组和缺血再灌注损伤组Drp1 (1.001±0.276; 1.985±0.301)、Bax(2.752±0.786;4.225±1.107)表达水平明显升高,Bcl-2 (0.749±0.128; 0.336±0.109)表达水平明显降低,线粒体膜电位降低的细胞数(72.5%;92.7%)均升高,ATP含量[(74.129±5.773) μmoL/g蛋白;(36.986±5.945) μmoL/g蛋白]及Na+-K+-ATP酶活性[(4.348±0.451) U/mg蛋白;(1.709±0.477) U/mg蛋白]、CaV-Mg2+-ATP酶活性[(1.955±0.287) U/mg蛋白;(1.123±0.181) U/rag蛋白]以及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性[(15.445±

作者:王敏;李瑜;王士雷;贾长新;周瑜;王金英;梁楠;姚如永

来源:中华神经医学杂志 2014 年 13卷 6期

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作者:
王敏;李瑜;王士雷;贾长新;周瑜;王金英;梁楠;姚如永
来源:
中华神经医学杂志 2014 年 13卷 6期
标签:
线粒体分裂抑制剂 脑缺血再灌注损伤 能量代谢障碍 细胞凋亡 Mdivi-1 Ischemia/reperfusion injury Energy metabolism Apoptosis
目的 探讨线粒体分裂抑制剂(mdivi-1)在脑缺血再灌注损伤中对能量代谢的影响.方法 将体外培养8d的Wistar大鼠海马神经元分为4组:正常对照组、赋形剂组、mdivi-1组、缺血再灌注损伤组,后两组利用海马神经元氧糖剥夺法建立缺血再灌注损伤模型,mdivi-1组建模前给予mdivi-1预处理40 min.缺血6h再灌注20 h后应用Western blotting检测各组海马神经元线粒体分裂蛋白1(Drp1)、B细胞淋巴癌/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平,应用流式细胞术检测线粒体膜电位,应用酶标仪法检测三磷酸腺苷(ATP)含量及Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性以及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性. 结果 与正常对照组比较,mdivi-1组和缺血再灌注损伤组Drp1 (1.001±0.276; 1.985±0.301)、Bax(2.752±0.786;4.225±1.107)表达水平明显升高,Bcl-2 (0.749±0.128; 0.336±0.109)表达水平明显降低,线粒体膜电位降低的细胞数(72.5%;92.7%)均升高,ATP含量[(74.129±5.773) μmoL/g蛋白;(36.986±5.945) μmoL/g蛋白]及Na+-K+-ATP酶活性[(4.348±0.451) U/mg蛋白;(1.709±0.477) U/mg蛋白]、CaV-Mg2+-ATP酶活性[(1.955±0.287) U/mg蛋白;(1.123±0.181) U/rag蛋白]以及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性[(15.445±