目的 培养胶质母细胞瘤干细胞,观察microRNA(miR)-153对其生物学功能的影响,探讨其在胶质母细胞瘤基因治疗中的应用. 方法 体外原代培养胶质母细胞瘤组织,免疫磁珠法分选CD133+细胞;免疫荧光染色检测分选后细胞CD133、巢蛋白(nestin),分化后细胞神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、微管相关蛋白2(MAP2)的表达进行鉴定.RT-PCR检测分选后CD133+细胞、CD133-细胞miR-153的表达;将人miR-153模拟体和无意义寡核苷酸链(NC)分别转染胶质母细胞瘤干细胞作为miR-153、NC组,7d后用成球试验检测miR-153对胶质母细胞瘤干细胞自我更新能力的影响.RT-PCR、免疫荧光染色分别检测2组细胞CD133、nestin、GFAP、MAP2 mRNA和蛋白的表达.转染后24、48、72、96和120 h CCK-8法检测2组细胞存活率.转染后3d流式细胞仪检测2组细胞凋亡率. 结果 培养的胶质母细胞瘤干细胞表达干细胞标记物CD133、nestin,分化后细胞表达星形胶质细胞的标志物GFAP、神经元的标志物MAP2;分选后CD133+细胞中miR-153的表达低于CD133-细胞,差异有统计学意义(P＜0.05).转染后7 dNC组细胞一、二次成球数目均高于miR-153组,差异有统计学意义(P＜0.05); RT-PCR检测显示与NC组比较,miR-153组细胞CD133、nestin mRNA表达降低,GFAP、MAP2 mRNA表达升高,差异有统计学意

作者：邓一帆；祝刚；罗洪海；李雪松；黄小山；李百升；秦忠宗

来源：中华神经医学杂志 2015 年 14卷 3期