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目的 探讨自噬是否在脑缺血再灌注损伤后被激活,及其对神经功能障碍恢复的影响. 方法 参照Longa方法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.(1)将42只SD大鼠按随机数字表法分为空白1组(n=9)及模型1组(n=33),模型1组又依据再灌注后取材时间不同分为再灌注后6h、12h、24h、48h、72h亚组,每亚组6只.应用透射电镜观察空白1组(n=3)及模型1组再灌注后24h亚组(n=3)大鼠海马组织细胞内超微结构变化及自噬体形成,应用Western blotting检测各组大鼠(n=6)海马组织中自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3)-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin-1的表达.(2)将18只SD大鼠按随机数字表法分为空白2组、模型2组及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组[于MCAO术前60 min通过立体定位技术侧脑室注射3-MA 10 μL(600 nmol)],每组6只.应用改良大鼠神经功能缺损评分(mNSS)于术后1d、3d、5d、7d时评估各组大鼠神经功能,应用HE染色观察各组大鼠术后7d时海马组织病理改变. 结果(1)模型1组再灌注后24 h亚组大鼠海马组织中可清晰地观察到自噬体形成,呈多层膜状结构.与空白1组比较,模型1组各亚组大鼠海马组织中LC3-Ⅱ/Ⅰ比值(除72h亚组外)及Beclin-1的表达明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型1组再灌注后24 h亚组比较,其他亚组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值及Beclin-1的

作者:何鹤;黄国志;曾庆;林依秋;林鸿新

来源:中华神经医学杂志 2018 年 17卷 2期

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作者:
何鹤;黄国志;曾庆;林依秋;林鸿新
来源:
中华神经医学杂志 2018 年 17卷 2期
标签:
脑缺血再灌注损伤 自噬 神经功能障碍 Cerebral ischemia reperfusion injury Autophagy Neurological dysfunction
目的 探讨自噬是否在脑缺血再灌注损伤后被激活,及其对神经功能障碍恢复的影响. 方法 参照Longa方法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.(1)将42只SD大鼠按随机数字表法分为空白1组(n=9)及模型1组(n=33),模型1组又依据再灌注后取材时间不同分为再灌注后6h、12h、24h、48h、72h亚组,每亚组6只.应用透射电镜观察空白1组(n=3)及模型1组再灌注后24h亚组(n=3)大鼠海马组织细胞内超微结构变化及自噬体形成,应用Western blotting检测各组大鼠(n=6)海马组织中自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3)-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin-1的表达.(2)将18只SD大鼠按随机数字表法分为空白2组、模型2组及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组[于MCAO术前60 min通过立体定位技术侧脑室注射3-MA 10 μL(600 nmol)],每组6只.应用改良大鼠神经功能缺损评分(mNSS)于术后1d、3d、5d、7d时评估各组大鼠神经功能,应用HE染色观察各组大鼠术后7d时海马组织病理改变. 结果(1)模型1组再灌注后24 h亚组大鼠海马组织中可清晰地观察到自噬体形成,呈多层膜状结构.与空白1组比较,模型1组各亚组大鼠海马组织中LC3-Ⅱ/Ⅰ比值(除72h亚组外)及Beclin-1的表达明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型1组再灌注后24 h亚组比较,其他亚组LC3-Ⅱ/Ⅰ比值及Beclin-1的