目的 研究Notch1通路对胶质瘤起始细胞(GICs)侵袭迁移能力的影响及调控机制.方法 (1)采用箱形图分析Bredel Brain、Sun Brain数据库中正常脑组织和胶质母细胞瘤组织Notch1mRNA的表达,采用Kaplan-Meier生存分析肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中胶质瘤患者的预后与Hes1表达的关系,采用热图分析GEO数据库中GICs、传统普通细胞系Notch1、CXCR4的表达.(2)采用免疫磁珠分选法建立U87 GICs和U251GICs系,免疫荧光染色检测细胞CXCR4、Notch1的表达.将U87 GICs和U251 GICs分为二甲基亚砜(DMSO)组、阴性对照无义序列(shNC)组、MK0752组、Notch1干扰序列(shNotch1)组,shNotch1组、shNC组细胞分别转染含shNotch1的重组慢病毒和对照序列,MK0752组、DMSO组细胞分别加入80 nmol/mL MK-0752和等量DMSO,Western blotting实验检测4组细胞Notch1、CXCR4、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白的表达.Transwell侵袭和迁移实验检测shNotch1组、shNC组细胞的侵袭和迁移能力. 结果 (1)箱形图显示胶质母细胞瘤组织Notch1 mRNA的表达高于正常脑组织,差异有统计学意义(P<0.05).生存分析显示高表达Hes1的胶质瘤患者生存率明显短于低表达Hes1的胶质瘤患者,差异有统计学意义(P<0.05).热图显示Notch1和CXCR4在GICs中表达高于传统普通
作者:易立;周星辰;李涛;陶震楠;童鹿青;马海文;刘沛东;解杨;杨学军
来源:中华神经医学杂志 2018 年 17卷 6期