目的 研究与热性惊厥相关癫痫中不同临床表型相关的SCN1A基因内含子突变对mRNA剪切的影响,探讨其剪切模式与临床表型-基因型-遗传模式的关系. 方法 采用Minigene体外剪切分析技术,对来自热性惊厥相关癫痫谱中的部分性癫痫伴热性惊厥附加症(PEFS+)和Dravet综合征(DS)患者的5个SCN1A基因内含子突变配对分组后进行分子克隆、HENK293细胞体外表达,应用逆转录PCR(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(qPCR)对各突变的mRNA剪切形式及其相对表达量进行定性定量分析. 结果 (1)RT-PCR显示DS相关突变c.602+1G＞A和c.4853-1G＞C均出现mRNA异常外显子丢失,且未见明确正常剪切mRNA;而PEFS+相关突变c.473+5G＞A、c.473+5G＞C和c.4853-25T＞A表现为外显子删除或内含子插入,正常和异常mRNA转录共存.(2)qPCR显示PEFS+相关突变c.473+5G＞A和c.473+5G＞C的异常mRNA的相对表达量分别为4.92％±1.05％和7.97％±1.12％,正常mRNA的相对表达量分别为6.10％±0.21％和3.94％±1.25％,分别与DS相关突变c.602+1G＞A的异常和正常mRNA的相对表达量(60.51％±1.81％和0.060％±0.022％)比较差异均有统计学意义(P＜0.05);PEFS+相关突变c.4853-25T＞A的正常和异常mRNA的相对表达量分别为71.22％±11.92％和7.38％±1.61％,分别与DS相关突变c.4853-1

作者：余璐；孟珩；汤斌；徐海清；蔡秀曲；何娜；刘晓蓉；黎冰梅；高玫梅；石奕武；易咏红；廖卫平

来源：中华神经医学杂志 2018 年 17卷 8期