目的 探讨下调微小RNA(miRNA)-99b表达对脑胶质瘤细胞侵袭的影响及其作用机制. 方法 体外常规培养脑胶质瘤U251细胞.(1)将U251细胞分为空白对照组、无义序列对照组和miRNA-99b抑制物组,后2组分别转染无义序列和miRNA-99b抑制物,空白对照组不做任何处理.采用RT-PCR检测U251细胞中miRNA-99b、哺乳动物雷帕霉素靶分子(mTOR)mRNA的表达,采用Western blotting检测U251细胞中mTOR、真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)及磷酸化(p)-4E-BP1蛋白的表达,采用Transwell侵袭实验检测U251细胞的侵袭能力.(2)将U251细胞分为无义序列对照组、mTOR siRNA组,分别转染无义序列和mTOR siRNA.采用RT-PCR检测U251细胞中miRNA-99b、mTOR mRNA的表达,采用Western blotting检测U251细胞中mTOR、p-4E-BP1蛋白的表达.(3)将U251细胞分为miRNA-99b抑制物+无义序列对照组、miRNA-99b抑制物+mTOR siRNA组,分别转染miRNA-99b抑制物+无义序列、miRNA-99b抑制物+mTORsiRNA.采用Western blotting检测U251细胞中p-4E-BP1蛋白的表达,采用Transwell侵袭实验检测U251细胞的侵袭能力. 结果 (1)与空白对照组、无义序列对照组比较,miRNA-99b抑制物组U251细胞中miRNA-99b mRNA表达明显降低,mTORmRNA及蛋白表达明显升高,p-4E-BP1蛋白表达明显升高,穿

作者：汲乾坤；任珂；赵建华；尹志杰；马鹏举；刘瑞华；金保哲

来源：中华神经医学杂志 2018 年 17卷 9期