目的:探讨人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/恢复(OGD/R)模型中应激诱导蛋白
Sestrin2基因过表达对线粒体分裂的调控作用及其机制。
方法:(1)将SH-SY5Y细胞分为正常对照组、OGD/R组、
Sestrin2过表达组及空载体组，后2组细胞预先采用慢病毒感染方法分别构建
Sestrin2过表达及空载体稳转细胞株，除正常对照组细胞外均给予氧糖剥夺4 h/恢复18 h造模处理。造模完成后采用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测各组细胞的存活率，采用Western blotting实验检测各组细胞中Sestrin2、线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胞浆Kelch样环氧氯丙胺相关蛋白1(Keap1)、胞核核因子E2相关因子2(Nrf2)的蛋白水平，采用透射电镜观察各组细胞中线粒体的超微结构，采用免疫荧光染色检测各组细胞中Nrf2的核移位情况。(2)将
Sestrin2过表达稳转SH-SY5Y细胞株分为
Sestrin2过表达组、鸦胆子苦醇+
Sestrin2过表达组、二甲基亚砜(DMSO)+
Sestrin2过表达组，后2组细胞在造模前分别给予Keap1/Nrf2通路抑制剂鸦胆子苦醇(终浓度100 nmol/L)或DMSO溶液(终体积分数0.1
作者：王秀芳；赫建帅；唐莹；吴秀云；于文刚；王亚楠；王士雷
来源：中华神经医学杂志 2021 年 20卷 8期
