目的模拟臭氧气浴治疗，观察医用臭氧气体对体外培养人表皮细胞的影响。方法取武汉大学同r医院暨武汉市第三医院泌尿外科包皮环切术后废弃包皮，消化分离表皮细胞原代培养后采用传代第3代细胞，在50 mg/L臭氧环境下进行实验干预。(1)观察原代和传代细胞,行Hoechst 33258染色观察细胞形态学变化与凋亡情况；(2)细胞活力检测分氧气组和臭氧组(n=5)，采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）及酶标仪检测无培养基时气体直接干预细胞，在短期内(0、5、10、15、20、25、30 s)的细胞活力趋势；(3)酶生化检测分为空气组、氧气组和臭氧组(n=5)，分别检测干预10、30、60 min各时间点的超氧化物歧化酶(SOD)活性水平、丙二醛含量、乳酸脱氢酶(LDH)及细胞内还原型谷胱甘肽( GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)的水平，并计算GSH/GSSG值。细胞活性吸光度值、酶生化组间两两比较及同组内多个时相点两两比较采用LSD-￡检验。结果 (1)原代培养的表皮细胞呈椭网状或多角状贴壁，稳定后呈典型的“铺路石”样，Hoechst 33258荧光染色后正常细胞核呈弥散均匀的淡蓝色荧光，臭氧干预后，随持续时间延长，出现浓染致密的亮蓝色颗粒，表皮细胞逐渐呈核固缩、染色质浓集和凋亡小体等凋亡特征，干预60 min时部分表皮细胞出现成片脱落；(2)臭氧直接
作者：叶子青；谢卫国；阮琼芳；阮晶晶；龚翔；赵超莉
来源：中华损伤与修复杂志（电子版） 2018 年 13卷 4期
