目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)和丝素蛋白/壳聚糖支架构建组织工程管状移植物在兔体内进行尿流改道的可行性和有效性。方法:本研究共选取雄性SPF级新西兰大白兔36只。(1)取新西兰大白兔6只，行耳缘静脉麻醉后，提取BMSC和并进行体外培养，选取第3代BMSC，进行爬片，流式细胞仪检测细胞表面标志物；(2)另取6只新西兰大白兔，耳缘静脉麻醉后，取膀胱组织块，对尿路上皮细胞进行分离、培养及鉴定；(3)采用Transwell法，对BMSC悬液进行培养，采用免疫荧光检测诱导分化后BMSC是否向尿路上皮表型分化，同时采用蛋白质印迹法及聚合酶链式反应检测UPIa、角蛋白(CK)-18的表达情况；(4)制备丝素蛋白/壳聚糖支架，并对制备好的支架的形态、孔隙率进行评估；(5)将诱导分化14 d后的BMSC浓度调至4×106/mL，逐滴加入盖满整个丝素蛋白/壳聚糖支架材料，设为实验组，对照组为同样浓度的细胞悬液置于细胞培养瓶培养，取培养1、3、5、7、9 d复合物，扫描电镜观察、评估丝素蛋白/壳聚糖支架上细胞生长情况，使用噻唑蓝比色法检测细胞在支架上的增殖能力，并进行活细胞/死细胞测试；(6)取剩下的新西兰大白兔24只，随机分为实验组和对照组，每组各12只。麻醉后，分别将接种BMSC和未种BMSC的丝素蛋白/壳聚糖支架埋入实验组和
作者：江伟；陈小刚；汪前亮
来源：中华损伤与修复杂志（电子版） 2021 年 16卷 1期
