目的 了解EGF通过过氧化物酶体增殖物激活受体β(PPARβ)调控HacaT细胞凋亡的作用.方法 将培养的HaCaT细胞根据培养液中所加物质不同分为对照组(常规培养);TNF-α组(加入10 ng/mL TNF-α);EGF组(加入20 ng/mL EGF);EGF+TNF-α组(用20 ng/mL EGF预处理后4 h,再予以10 ng/mL TNF-α处理60 min).采用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)及荧光素酶基因分析法检测各组细胞中PPARβ的结合活性及转录活性;将细胞转染错义寡核苷酸(scrODN)及反义寡核苷酸(asODN)后,采用蛋白质印迹法检测PPARβ蛋白的表达;应用流式细胞术检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(easpase-3)活性及细胞凋亡率. 结果 EMSA及荧光素酶基因分析显示,各实验组PPARβ的DNA结合活性及转录性增强;蛋白质印迹法显示,与转染scrODN的各组细胞比较,转染asODN的各组PPARβ蛋白表达明显被抑制.转染asODN的TNF-α组及EGF+TNF-α组caspase-3活性明显高于转染scrODN的TNF-α组及EGF+TNF-α组(P<0.01).转染scrODN的对照组、EGF组、TNF-α组和EGF+TNF-α组的细胞凋亡率分别为(7.31±0.45)
作者：周捷；梁鹏飞；蒋碧梅；黄晓元
来源：中华烧伤杂志 2009 年 25卷 4期
