目的 了解热刺激对小鼠皮肤KC表面柯萨奇-腺病毒受体(CAR)表达的影响及CAR对树突状表皮T淋巴细胞(DETC)分泌细胞生长因子的作用. 方法 (1)取20只BALB/c小鼠,按随机数字表法分为热刺激组和对照组,每组10只.热刺激组小鼠用经100℃热水浸泡约3 min后拧干的湿纱布作用于背部脱毛区1～3s造成不超过Ⅰ度烫伤的损伤；对照组小鼠用经室温水浸泡后拧干的湿纱布作用于背部脱毛区1～3s致假伤.留取脱毛区中央2.0 cm×2.0 cm方形全层皮肤,免疫组织化学染色法观察皮肤组织切片中CAR的表达,实时荧光定量RT-PCR、蛋白质印迹法分别测定小鼠皮肤组织中CAR的mRNA和蛋白表达水平 (2)取2只BALB/c胎鼠,切取躯干全层皮肤,分离培养KC,按随机数字表法分为热刺激组和对照组,每组设5个复孔,对照组置于常规培养箱中培养1h,热刺激组置于42℃、体积分数5％二氧化碳培养箱中培养1h,随后均于常规环境中继续培养6h,用流式细胞仪检测KC的凋亡率和CAR的表达.(3)取5只BALB/c小鼠断颈处死,切取躯干全层皮肤,分离培养提纯小鼠DETC,按随机数字表法分为7组,对照组不加任何刺激因素,0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/L CAR组培养液中添加相应浓度的重组鼠CAR,每组设5个复孔,用ELISA法测定胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF-Ⅰ)、角质形成细胞生长因子(KGF)
作者：邓向东；陈复兴；刘军权；周忠海；贾赤宇
来源：中华烧伤杂志 2014 年 30卷 1期
