目的 探讨人羊膜间充质干细胞(hAMSC)培养上清液(hAMSC-CS)对人Fb生物学功能的影响. 方法 (1)取废弃胎盘新鲜羊膜组织,分离hAMSC,并进行传代培养.倒置相差显微镜下观察培养3d及第3代hAMSC形态.(2)取2批次第3代hAMSC,免疫荧光染色法检测细胞波形蛋白表达,流式细胞仪检测细胞表面标志物CD90、CD73、CD105及CD45表达.(3)收集培养72 h的第3代hAMSC-CS,ELISA法检测其中胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、血管内皮生长因子(VEGF)、EGF、bFGF的含量.(4)取包皮环切术后废弃包皮,分离人Fb,并进行传代培养.采用第3代人Fb进行以下实验.按随机数字表法(分组方法下同)将细胞分为空白对照组及10％、30％、50％、70％hAMSC-CS组,每组48孔.空白对照组用含体积分数2％ FBS的DMEM/F12培养液培养,后4组分别用含相应体积分数hAMSC-CS和体积分数2％ FBS的DMEM/F12培养液培养.培养12、24、48、72 h,采用细胞计数试剂盒8及酶标仪检测细胞增殖活性.选取使人Fb增殖活性最高的相应体积分数hAMSC-CS用于以下实验.(5)另取人Fb,分为空白对照组及50％ hAMSC-CS组,同(4)处理,每组4孔.分别于划痕后0(即刻)、12、24、48、72 h,于倒置相差显微镜下观测细胞迁移距离.(6)另取人Fb,同(5)分组处理,每组3瓶,流式细胞仪检测细胞凋亡率.对数据行析因设计

作者：吴骐而；吕璐；辛海明；罗亮；童亚林；莫永亮；岳毅刚

来源：中华烧伤杂志 2016 年 32卷 6期