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目的 模拟增生性瘢痕形成和演变过程中的环境因素,探讨中、重度低氧低血清蛋白对人增生性瘢痕Fb(HSF)功能的影响.方法 常规培养人HSF,取第3~6代细胞按照随机数字表法分为10.0%氧气+10.0%小牛血清(FCS)、5.0%氧气+5.0% FCS、0.5%氧气+0.5% FCS组,先用不含FCS的DMEM培养液培养24 h后,再采用相应体积分数的氧气和FCS培养.采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性(结果以实际细胞数表示),天狼星红染色法检测细胞总胶原含量(结果以吸光度值表示),蛋白质印迹法检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、TGF-β1、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、P53的蛋白表达(结果以灰度值比值表示),原位末端标记法检测细胞凋亡率.以上实验每组样本数均为3.对数据行Kruskal-Wallis检验、Dunnett检验.结果 (1)与10.0%氧气+10.0% FCS组的(11 000±1 306)个比较,5.0%氧气+5.0% FCS组细胞增殖活性较高[(13 290±1 500)个,P<0.05],0.5%氧气+0.5% FCS组细胞增殖活性较低[(6 999±765)个,P<0.05].(2)与10.0%氧气+ 10.0% FCS组(0.039 6 ±0.004 2)比较,5.0%氧气+5.0% FCS组细胞总胶原含量较高(0.051 6±0.005 1,P<0.05),0.5%氧气+0.5% FCS组细胞总胶原含量较低(0.015 6±0.002 4,P<0.05).(3)与10.0%氧气+10.0% FCS

作者:董叫云;宋菲;刘英开;王西樵

来源:中华烧伤杂志 2016 年 32卷 10期

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作者:
董叫云;宋菲;刘英开;王西樵
来源:
中华烧伤杂志 2016 年 32卷 10期
标签:
瘢痕 细胞低氧 成纤维细胞 细胞增殖 细胞凋亡 胶原 低血清 Cicatrix Cell hypoxia Fibroblasts Cell proliferation Apoptosis Collagen Low concentration of serum
目的 模拟增生性瘢痕形成和演变过程中的环境因素,探讨中、重度低氧低血清蛋白对人增生性瘢痕Fb(HSF)功能的影响.方法 常规培养人HSF,取第3~6代细胞按照随机数字表法分为10.0%氧气+10.0%小牛血清(FCS)、5.0%氧气+5.0% FCS、0.5%氧气+0.5% FCS组,先用不含FCS的DMEM培养液培养24 h后,再采用相应体积分数的氧气和FCS培养.采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性(结果以实际细胞数表示),天狼星红染色法检测细胞总胶原含量(结果以吸光度值表示),蛋白质印迹法检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、TGF-β1、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、P53的蛋白表达(结果以灰度值比值表示),原位末端标记法检测细胞凋亡率.以上实验每组样本数均为3.对数据行Kruskal-Wallis检验、Dunnett检验.结果 (1)与10.0%氧气+10.0% FCS组的(11 000±1 306)个比较,5.0%氧气+5.0% FCS组细胞增殖活性较高[(13 290±1 500)个,P<0.05],0.5%氧气+0.5% FCS组细胞增殖活性较低[(6 999±765)个,P<0.05].(2)与10.0%氧气+ 10.0% FCS组(0.039 6 ±0.004 2)比较,5.0%氧气+5.0% FCS组细胞总胶原含量较高(0.051 6±0.005 1,P<0.05),0.5%氧气+0.5% FCS组细胞总胶原含量较低(0.015 6±0.002 4,P<0.05).(3)与10.0%氧气+10.0% FCS