目的 制备3-[4-[2-羟基-(1-甲基乙胺基)丙氧基]苯基]丙酸十六醇酯(PAC)修饰的纳米粒,观察其对心肌细胞的靶向性及对心肌的保护作用. 方法 (1)将HL-1心肌细胞按随机数字表法分成花青素Cy3标记的非靶向小干扰RNA(Cy3-siNC)组和针对NF-κB-p65基因设计的花青素Cy3标记的小干扰RNA(Cy3-si435)组,每组3孔.Cy3-siNC组细胞转染Cy3-siNC,Cy3-si435组细胞转染Cy3-si435.转染24 h,实时荧光定量PCR检测细胞NF-κB-p65 mRNA的表达.(2)采用复乳溶剂挥发法制备PAC修饰且载有Cy3-siNC(Cy3-siNC-PAC)的纳米粒和PAC修饰且载有Cy3-si435(Cy3-si435-PAC)的纳米粒.扫描电镜观察Cy3-si435-PAC纳米粒的形态,纳米粒度及zeta电位仪检测Cy3-si435-PAC纳米粒的粒径和电势,紫外分光光度计测定Cy3-si435-PAC纳米粒的包封率、载药量,透析法测定Cy3-si435-PAC纳米粒的Cy3-si435释放量.(3)另取HL-I细胞,按随机数字表法分成4组,每组9孔.阴性对照组加入5μL PBS;25、50、100 mg/mL Cy3-si435-PAC纳米粒组分别加入5μL 25、50、100 mg/mL的Cy3-si435-PAC纳米粒.分别于转染6、12、24 h时,每组各取3孔,噻唑蓝法检测细胞的增殖活性 (4)另取HL-1细胞,培养24 h后加入100 μL Cy3-si435-PAC纳米粒.分别于转染0、4、8、12、24 h时各取3孔细胞,流式
作者:刘莹莹;王晨;罗鹏飞;夏照帆
来源:中华烧伤杂志 2017 年 33卷 11期