目的 初步探讨瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)对体外培养的缺氧早期小鼠心肌细胞自噬的影响及机制. 方法 取120只1～2d龄雌雄不拘C57BL/6小鼠,分离心脏培养原代心肌细胞,并进行如下实验,分组方法均按照随机数字表法.(1)将细胞分为常氧组及缺氧3、6、9h组,每组1孔.常氧组细胞行常规培养(下同),缺氧3、6、9h组细胞采用不含胎牛血清的DMEM无糖培养基于体积分数1％氧气、5％二氧化碳、94％氮气的低氧条件下分别培养3、6、9h.蛋白质印迹法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1及TRPV1的蛋白表达.(2)将细胞分为常氧组和缺氧组,每组2张盖玻片,其中缺氧组细胞同前缺氧处理6h.免疫荧光法检测TRPV1的阳性表达.(3)将细胞分为4组,每组1孔.单纯缺氧组细胞同前行缺氧处理6h;缺氧+0.1μmol/L辣椒素组、缺氧+1.0 μmol/L辣椒素组、缺氧+10.0 μmol/L辣椒素组细胞分别加入0.1、1.0、10.0 μmol/L辣椒素处理30 min后,行缺氧处理6h.蛋白质印迹法检测LC3、Beclin-1及TRPV1的蛋白表达.(4)将细胞分为5组,每组5孔.缺氧组细胞同前缺氧处理6h;缺氧+氯喹组、缺氧+辣椒素组、缺氧+辣椒素+氯喹组细胞分别加入50 μmol/L氯喹、10.0μmol/L辣椒素、50 μmol/L氯喹+10.0 μmol/L辣椒素处理30 min后缺氧处理6h.细胞计数试剂盒8法检测细

作者：韦劲宇；崔琳；林洁志；张琼；袁红萍；向飞；宋华培；贾杰只；吕艳玲；张东霞；黄跃生

来源：中华烧伤杂志 2019 年 35卷 3期