目的 探讨非受体酪氨酸激酶Tec在内毒素/脂多糖(LPS)诱导人肺泡上皮细胞A549促炎性细胞因子白细胞介素8(IL-8)产生中的作用及机制. 方法 将人肺泡上皮细胞A549用含体积分数10％胎牛血清的RPMI-1640培养液常规培养传代,取第2或第3代细胞进行后续实验.(1)取细胞,按随机数字表法分为6组,每组4孔.空白对照组细胞常规培养2h;单纯LPS组细胞常规培养1h后加入1μg/mL的LPS刺激1h;单纯LFM-A13组细胞于常规培养液中加入75 μmol/L的LFM-A13处理1h后更换培养液常规培养1h;25 μmol/L LFM-A13+ LPS组、75 μmol/L LFM-A13+LPS组、100 μmol/L LFM-A13+ LPS组细胞分别于常规培养液中加入25、75、100 μmol/L的LFM-A13处理1h后,均更换培养液并加入1 μg/mL的LPS刺激1h.采用蛋白质印迹法检测各组细胞内Tec的蛋白表达情况,采用酶联免疫吸附测定法检测各组细胞培养上清液中IL-8的含量.(2)取细胞,按随机数字表法分为5组,每组4孔.空白对照组细胞常规培养2h;小干扰RNA(siRNA)对照+LPS组细胞用空的慢病毒转染10 h后,于常规培养液中加入1μg/mL的LPS刺激2h;Tec mus-298 RNAi+LPS组、Tec mus-299 RNAi+ LPS组、Tec mus-300 RNAi+ LPS组细胞分别用搭载Tec mus-298 RNAi、Tec mus-299 RNAi、Tec mus-300 RNAi的慢病毒转染10 h后,均

作者：王艺；胡迎；王飞；刘晟；王永杰；陈旭林

来源：中华烧伤杂志 2019 年 35卷 8期