目的 构建血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF) 165基因的腺病毒表达载体,并观察其感染血管内皮细胞后目的基因的表达及对皮瓣存活的影响.方法 采用复制缺陷型重组腺病毒载体介导的VEGF165基因(Ad-VEGF165)感染原代培养血管内皮细胞和大鼠背部随意皮瓣组织,分别从体外和体内实验两方面研究Ad-VEGF165感染对靶细胞或/和组织生物学特征和血管生成的影响,实时定量聚合酶链反应(qPCR)和Western印迹分析法(Western Blot)检测腺病毒介导的外源性VEGF165基因在血管内皮细胞中的转录和表达,观察其增强皮瓣存活的潜力.结果 Ad-VEGF165转染后,血管内皮细胞中的VEGF165含量较对照组和腺病毒空载体感染组均明显升高(P<0.05);Ad-VEGF165组、腺病毒空载体组和对照组比较,皮瓣组织中的VEGF165表达差异显著(P<0.05),血管生长更旺盛.结论 Ad-VEGF165感染皮瓣组织后,能显著增加VEGF165蛋白表达水平,促进血管生成,为进一步开展VEGF165基因提高皮瓣移植成活率的临床研究奠定了实验基础.
作者:王立波;初海坤;孙智颖;徐衍斌;周丽;李敏
来源:中华手外科杂志 2015 年 31卷 6期