质粒pEH920和pDW79为播入了登革病毒2型(DV
2)cDNA片段的重组克隆。通过插入酶酶切、电泳分离、低融点胶回收,从pEH920及pDW79制备了DV
2 cDNA片段。分别以α-
32PdCTP及地高辛素-11-dUTP标记DV
2 cDNA作探针,采用斑点核酸杂交技术检测了感染DV LC/36白蚊伊蚊细胞上清中的核酸。从纯化的DV
2样品中提取RNA作定量观察,纯化DV
2cDNA及提纯DV
2RNA作阳性对照,以DV1、3、4、 JE及正常LC/36细胞培养上清对照观察探针的特异性。结果表明,
32P和地高辛素标记DV
2 cDNA探针都显示DV
2 RNA特异性,其敏感度分别为7.5ng和31ng,由国际原型株DV
2 cDNA制备的探针亦可以与我国南方分离株DV
2 RNA杂交。
作者:陈火胜;郭辉玉;陈焕勇;梁业楷;汤伟琪;卓礼梅
来源: 1992 年 06卷 3期