目的 构建含输血传播病毒(TT V)部分基因序列的原核表达载体并进行表达及产物活性的鉴定。方法 在计算机模拟基础上,采用PCR的方法 ,从一名非甲~庚肝炎患者血清中,扩增编码蛋白具有抗原活性的TTV ORF2部分基因片段。将该片段插入表达载体pQE-30,在大肠埃希菌中进行表达并利用酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定表达产物活性。结果 SDS-PAGE电泳后经电脑分析显示,表达产物相对分子质量与预计相同,表达量占菌体总蛋白量的22.33%。经ELISA检测表明表达产物有结合抗体活性。结论 成功构建了含TTV部分基因的原核表达载体,表达产物具有抗原活性。
作者:李伯安;程云;郑宇;苏琴;高蓉;李靖;侯俊
来源:中华实验和临床病毒学杂志 2000 年 14卷 3期