目的筛选、鉴定抗丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5A的人源单链可变区抗体(ScFv)的编码基因,为HCV NS5A蛋白质生物学功能的研究及抗HCV的基因治疗研究开辟新途径.方法采用噬菌体表面展示技术,以重组纯化的HCV非结构蛋白NS5A为固相抗原,从噬菌体单链可变区抗体半合成库中经过5轮"吸附-洗脱-扩增”筛选过程,获得抗原结合活性和特异性较强的HCV NS5A人源单链可变区抗体基因片段的阳性克隆,并对其进行免疫检测及序列测定.结果筛选得到的ScFv片段基因核苷酸序列为789 nt,编码由262个氨基酸残基组成的多肽,具有典型的免疫球蛋白轻链和重链可变区的结构特点.基因编码产物具有HCV NS5A蛋白反应的免疫学活性和特异性.结论利用噬菌体抗体库技术,成功获得了HCV NS5A人单链可变区抗体ScFv编码基因,并获得了可溶性单链抗体的表达.
作者：成军；钟彦伟；施双双；刘妍；王刚；董菁；夏小兵；陈菊梅
来源：中华实验和临床病毒学杂志 2001 年 15卷 3期
