目的研究肝癌患者肝组织中2.2 kb乙型肝炎病毒基因组剪接变异体的结构和功能.方法 PCR扩增12对肝癌组织及癌旁肝组织中的乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)全基因组.克隆3.2 kb全长HBV基因组及2.2 kb剪接变异体基因组,测序并比较它们基因结构的差异.将2.2 kb HBV剪接体基因组与全长基因组共同转染Hep G2细胞,分别以HBV全长基因组特异性引物及剪接变异体特异性引物对转染后细胞内HBV核心颗粒进行PCR检测,以判定2.2 kb HBV剪接变异体对全长HBV复制功能的影响.结果 2.2 kb HBV基因组剪接变异体见于所有的癌组织及癌旁组织.相同模板量获得的扩增产物进行图象扫描分析,发现癌组织中2.2 kb HBV基因组剪接变异体与全长HBV的比值高于癌旁组织.序列分析表明,2.2 kb HBV剪接变异体保留5′端包装信号以及与完整的X基因、C及preC基因.细胞转染结果显示,加入2.2 kb剪接变异体共转染,细胞中3.2 kb全长HBV基因组的复制量可增强3～7倍.结论肝组织内普遍存在2.2 kb HBV基因组剪接变异体,该变异体在癌组织中的相对量高于癌旁组织.2.2 kb HBV基因组剪接变异体可使全长HBV基因组复制增强,提示可能与肝癌的发生、发展相关.
作者：林旭；闻玉梅；万大方；钱耕荪；顾健人
来源：中华实验和临床病毒学杂志 2002 年 16卷 1期
