目的为了表达森林脑炎病毒prM-E蛋白,为森林脑炎快速诊断试剂的研制奠定基础.方法经过RT-PCR扩增、重组转移载体构建、细菌内转座和昆虫细胞转染,以杆状病毒-昆虫细胞表达系统成功地表达了森林脑炎病毒MDJ01株prM-E蛋白.结果从感染细胞上清中电镜观察到重组蛋白形成的球型颗粒,说明重组病毒感染细胞后产生病毒样表达颗粒(virus like particlesVLPs),并且分泌至细胞外.免疫印迹试验和间接免疫荧光试验表明,表达的重组蛋白能够与抗森林脑炎病毒抗体特异结合,具有良好的抗原性.ELISA和间接免疫荧光染色证实,重组prM-E蛋白可以作为抗原用于检测患者血清特异性抗体.结论在昆虫细胞中表达的prM-E具有良好的抗原性,本研究为森林脑炎快速特异诊断试剂研制奠定了基础.
作者：刘艳丽；司炳银；户义；张雨；杨银辉；祝庆余
来源：中华实验和临床病毒学杂志 2005 年 19卷 4期
