目的 利用酿酒酵母系统建立表达脊髓灰质炎Ⅰ型病毒(Poliovirus Ⅰ)病毒样颗粒的技术方法,为研究新型脊髓灰质炎预防性重组疫苗奠定前期基础.方法 合成密码子优化后的Poliovirus Ⅰ型的P1及3CD基因,通过分子克隆技术构建同时表达P1和3CD基因的表达载体,通过化学法转到酿酒酵母胞内,诱导表达并破碎酵母后,利用氯化铯密度梯度离心法提取物进行初步纯化并鉴定.结果 重组酿酒酵母质粒通过酶切及测序鉴定证明P1及3CD片段成功插入到pESC-URA载体中.密码子优化后基因与未优化基因编码的氨基酸序列完全一致.透射电镜分析显示将重组质粒转到酿酒酵母细胞内可以有效表达并组装脊髓灰质炎Ⅰ型病毒的病毒样颗粒.结论 在酿酒酵母细胞内同时表达P1和3CD蛋白可以有效组装脊髓灰质炎Ⅰ型病毒的病毒样颗粒.
作者：王晓雯；盛望；曾毅
来源：中华实验和临床病毒学杂志 2013 年 27卷 5期
