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目的:比较模拟水样中甲肝病毒( HAV)超滤浓缩和PEG浓缩方法,为水中HAV检测提供参考。方法向模拟水样中接种已知量的HAV,分别选用Millipore和Sartorius公司的100KD和50KD孔径的微孔超滤管及终浓度为10%聚乙二醇(PEG)-1M氯化钠(NaCl)沉淀的方法对模拟水样进行浓缩,采用荧光定量RT-PCR方法检测浓缩后的病毒量,用SPSS21.0对数据进行统计学分析。结果采用同一孔径不同厂家的超滤管浓缩病毒无统计学差异(P=0.25,P=0.532),对浓缩后的CT值及回收量进行分组比较,结果均表明不同处理方法有统计学差异( P=0.000<0.05,P=0.000<0.05),其中50KD组浓缩病毒回收率为(94.57±16.26%),100KD组浓缩病毒回收率为(52.37±14.75%),10%PEG-1.0MNaCl沉淀病毒回收效率为(63.5±8.45%)。结论超滤和PEG沉淀两种方法均可用于水样中HAV浓缩,超滤管浓缩病毒操作简便,耗时更短,选择合适孔径可以提高HAV病毒回收率,本实验中50KD超滤管HAV回收率高于100KD;PEG更适用处理大体积样本。

作者:赵霖;周文亭;曹经瑗;毕胜利

来源:中华实验和临床病毒学杂志 2016 年 1期

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作者:
赵霖;周文亭;曹经瑗;毕胜利
来源:
中华实验和临床病毒学杂志 2016 年 1期
标签:
甲肝病毒 病毒浓缩 PEG浓缩 超滤 荧光定量RT-PCR Hepatitis A virus viral concentration PEG ultrafiltration fluorescence quantitative RT-PCR
目的:比较模拟水样中甲肝病毒( HAV)超滤浓缩和PEG浓缩方法,为水中HAV检测提供参考。方法向模拟水样中接种已知量的HAV,分别选用Millipore和Sartorius公司的100KD和50KD孔径的微孔超滤管及终浓度为10%聚乙二醇(PEG)-1M氯化钠(NaCl)沉淀的方法对模拟水样进行浓缩,采用荧光定量RT-PCR方法检测浓缩后的病毒量,用SPSS21.0对数据进行统计学分析。结果采用同一孔径不同厂家的超滤管浓缩病毒无统计学差异(P=0.25,P=0.532),对浓缩后的CT值及回收量进行分组比较,结果均表明不同处理方法有统计学差异( P=0.000<0.05,P=0.000<0.05),其中50KD组浓缩病毒回收率为(94.57±16.26%),100KD组浓缩病毒回收率为(52.37±14.75%),10%PEG-1.0MNaCl沉淀病毒回收效率为(63.5±8.45%)。结论超滤和PEG沉淀两种方法均可用于水样中HAV浓缩,超滤管浓缩病毒操作简便,耗时更短,选择合适孔径可以提高HAV病毒回收率,本实验中50KD超滤管HAV回收率高于100KD;PEG更适用处理大体积样本。