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目的 制备抗H7N9亚型流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)单克隆抗体,并对单抗的活性与功能进行初步鉴定.方法 利用免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,获取杂交瘤细胞株,用间接ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞克隆,单克隆化后制备小鼠腹水单抗,纯化获得抗H7 N9亚型流感病毒NA的鼠源单克隆抗体,对抗体活性及功能进行鉴定.结果 获得特异性抗H7 N9亚型流感病毒N9鼠源单克隆抗体1G8、3C4和4E8,这三株抗体识别抗原表位不同,3C4和4E8能抑制神经氨酸酶活性,IC50分别为1.45 μg/ml和8.65 μg/ml.结论 3株单克隆抗体均特异性识别A/Anhui/1/2013(H7N9)的N9蛋白,有较好的N9结合活性或能抑制N9酶活性功能.本研究对新型H7N9禽流感病毒的诊断和防控提供了一个良好的思路.

作者:于悦洋;谢怡然;陈迎珠;孙颖;张恒;鲁健;刘丽琦;王大燕;舒跃龙

来源:中华实验和临床病毒学杂志 2017 年 31卷 1期

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作者:
于悦洋;谢怡然;陈迎珠;孙颖;张恒;鲁健;刘丽琦;王大燕;舒跃龙
来源:
中华实验和临床病毒学杂志 2017 年 31卷 1期
标签:
流感病毒 神经氨酸酶 单克隆抗体 Influenza virus Neuraminidase Monoclonal antibody
目的 制备抗H7N9亚型流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)单克隆抗体,并对单抗的活性与功能进行初步鉴定.方法 利用免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,获取杂交瘤细胞株,用间接ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞克隆,单克隆化后制备小鼠腹水单抗,纯化获得抗H7 N9亚型流感病毒NA的鼠源单克隆抗体,对抗体活性及功能进行鉴定.结果 获得特异性抗H7 N9亚型流感病毒N9鼠源单克隆抗体1G8、3C4和4E8,这三株抗体识别抗原表位不同,3C4和4E8能抑制神经氨酸酶活性,IC50分别为1.45 μg/ml和8.65 μg/ml.结论 3株单克隆抗体均特异性识别A/Anhui/1/2013(H7N9)的N9蛋白,有较好的N9结合活性或能抑制N9酶活性功能.本研究对新型H7N9禽流感病毒的诊断和防控提供了一个良好的思路.