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目的建立胆管癌差异显示cDNA片段L2与人类基因组序列间联系,克隆人类胆管癌相关基因CCR-L2/FXYD6,测序、鉴定以供进一步研究.方法通过同源性比较获取覆盖L2cDNA的基因组序列,经序列分析设计可能目的基因的扩增引物1对.提取手术切除新鲜胆管癌组织总RNA,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增人cDNA,克隆于载体pGEM-T,酶切、测序鉴定.结果从胆管癌组织中得到人CCR-L2/FXYD6基因大片段克隆(540 bp),经测序与人基因组序列吻合,证实该基因在胆管癌组织表达明显,在正常胆管组织中低表达.结论克隆出人CCR-L2/FXYD6基因的大片段,该基因在胆管肿瘤与正常组织表达存在明显差异,为进一步研究该基因的功能奠定基础.

作者:万涛;倪彬;刘建伟;叶玲;周宁新

来源:中华实验外科杂志 2003 年 20卷 5期

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作者:
万涛;倪彬;刘建伟;叶玲;周宁新
来源:
中华实验外科杂志 2003 年 20卷 5期
标签:
胆管癌 基因表达 克隆 鉴定
目的建立胆管癌差异显示cDNA片段L2与人类基因组序列间联系,克隆人类胆管癌相关基因CCR-L2/FXYD6,测序、鉴定以供进一步研究.方法通过同源性比较获取覆盖L2cDNA的基因组序列,经序列分析设计可能目的基因的扩增引物1对.提取手术切除新鲜胆管癌组织总RNA,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增人cDNA,克隆于载体pGEM-T,酶切、测序鉴定.结果从胆管癌组织中得到人CCR-L2/FXYD6基因大片段克隆(540 bp),经测序与人基因组序列吻合,证实该基因在胆管癌组织表达明显,在正常胆管组织中低表达.结论克隆出人CCR-L2/FXYD6基因的大片段,该基因在胆管肿瘤与正常组织表达存在明显差异,为进一步研究该基因的功能奠定基础.