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目的探讨半乳糖受体介导的增殖细胞核抗原(PCNA)反义核酸(ASODN)对肝癌Bel-7402细胞增殖的靶向抑制作用.方法选择来源于3个不同系统的肿瘤细胞:肝癌Bel-7402细胞、肺腺癌GLC-82细胞、慢性髓系白血病K562细胞,将半乳糖-聚乙烯亚胺(Gal-PEI)与PCNA反义核酸结合形成交联复合物Gal-PEI-ASODN,台盼兰拒染计数法观察不同浓度Gal-PEI-ASODN对这3种细胞增殖的影响;流式细胞仪检测3种细胞对羧基荧光素(FAM)标记的Gal-PEI-ASODN的摄取率及细胞内平均荧光强度;相差/荧光显微镜观察FAM标记的Gal-PEI-ASODN及ASODN进入3种不同细胞的情况.结果浓度从10 μmol/L到40 μmol/L的ASODN作用于Bel-7402细胞48 h后,可抑制其增殖,IC50为29.3 μmol/L.浓度从0.05 μmol/L到0.25 μmol/L的ASODN作用于Bel-7402细胞48 h后,均未显著抑制其增殖;相同浓度的Gal-PEI-ASODN作用于3种不同细胞48 h后,对GLC-82细胞、K562细胞的增殖未产生显著抑制作用,而Bel-7402细胞的增殖却受到明显抑制.对于Bel-7402细胞,Gal-PEI-ASODN的IC50为0.06 μmol/L,与单纯ASODN组相比,增敏倍数为488倍.FAM标记的Gal-PEI-ASODN或ASODN与不同细胞孵育0.5 h到2.0 h内,Gal-PEI-ASODN-Bel-7402细胞组所有时间点的细胞荧光摄取率、胞内平均荧光强度均显著高于ASODN-B

作者:曹明溶;黄光胜;蒋建伟;劳学军;庞钊

来源:中华实验外科杂志 2005 年 22卷 11期

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作者:
曹明溶;黄光胜;蒋建伟;劳学军;庞钊
来源:
中华实验外科杂志 2005 年 22卷 11期
标签:
半乳糖受体 增殖细胞核抗原 反义寡核苷酸类 癌细胞,肝 靶向
目的探讨半乳糖受体介导的增殖细胞核抗原(PCNA)反义核酸(ASODN)对肝癌Bel-7402细胞增殖的靶向抑制作用.方法选择来源于3个不同系统的肿瘤细胞:肝癌Bel-7402细胞、肺腺癌GLC-82细胞、慢性髓系白血病K562细胞,将半乳糖-聚乙烯亚胺(Gal-PEI)与PCNA反义核酸结合形成交联复合物Gal-PEI-ASODN,台盼兰拒染计数法观察不同浓度Gal-PEI-ASODN对这3种细胞增殖的影响;流式细胞仪检测3种细胞对羧基荧光素(FAM)标记的Gal-PEI-ASODN的摄取率及细胞内平均荧光强度;相差/荧光显微镜观察FAM标记的Gal-PEI-ASODN及ASODN进入3种不同细胞的情况.结果浓度从10 μmol/L到40 μmol/L的ASODN作用于Bel-7402细胞48 h后,可抑制其增殖,IC50为29.3 μmol/L.浓度从0.05 μmol/L到0.25 μmol/L的ASODN作用于Bel-7402细胞48 h后,均未显著抑制其增殖;相同浓度的Gal-PEI-ASODN作用于3种不同细胞48 h后,对GLC-82细胞、K562细胞的增殖未产生显著抑制作用,而Bel-7402细胞的增殖却受到明显抑制.对于Bel-7402细胞,Gal-PEI-ASODN的IC50为0.06 μmol/L,与单纯ASODN组相比,增敏倍数为488倍.FAM标记的Gal-PEI-ASODN或ASODN与不同细胞孵育0.5 h到2.0 h内,Gal-PEI-ASODN-Bel-7402细胞组所有时间点的细胞荧光摄取率、胞内平均荧光强度均显著高于ASODN-B