目的观察温度对罗非鱼肝细胞原代培养的影响.方法胶原酶冷消化法分离罗非鱼肝细胞,以含多种辅助因子的培养基培养.台盼蓝拒染法测细胞活力.倒置光显微镜观察罗非鱼肝细胞的形态,透射电镜观察超微结构.按不同培养温度分为A(28℃)、B(37℃)和C(39℃)三组.比较各组不同时期培养上清液中白蛋白和谷丙转氨酶含量.结果新分离的罗非鱼肝细胞形态完整.37℃下与28℃下培养,生长良好、可存活2~3周.39℃下培养,可存活5~7 d.A组和B组培养上清液中白蛋白和谷丙转氨酶含量比较差异均无统计学意义(P>0.05),C组和A、B组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论胶原酶冷消化法是一种较好的鱼肝细胞分离方法.罗非鱼肝细胞体外培养可耐受37~39℃高温.
作者:赵中辛;周主青
来源:中华实验外科杂志 2006 年 23卷 6期