目的 观察转染NK4基因对膀胱癌上皮细胞HGF基因表达的影响.方法 利用脂质体Lipofectin-2000将质粒pcDNA3(+)/NK4导入BIU-87膀胱癌细胞,用pcDNA3(+)作为阴性对照.G418稳定筛选阳性细胞克隆后,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞和对照组细胞NK4基因mRNA水平表达,Western blot检测转染后细胞培养上清液NK4和细胞胞质HGF蛋白的表达含量.结果 转染阳性细胞NK4 mRNA恒定表达,RT-PCR和Western blot分别显示在mRNA转录水平和蛋白表达水平,稳定转染的膀胱癌细胞NK4含量明显高于对照组.转染了NK4基因的肿瘤细胞HGF蛋白表达水平明显降低,而转染空载体则无作用.结论 脂质体将外源NK4基因导入肿瘤细胞后能稳定表达NK4蛋白,而且可以有效降低肿瘤细胞HGF表达的水平.
作者:潘卫兵;张青汉;余毅恺;叶绪龙;董能本;彭伟;Toshikazu Nakamura
来源:中华实验外科杂志 2007 年 24卷 5期