目的 确定Ki-67启动子内调控转录最关键的Sp1顺式作用元件,探讨肿瘤细胞Ki-67基因高表达机制.方法 对Ki-67启动子内(-170~-145 nt)位置的Sp1顺式作用元件A2含有的两个Sp1一致性序列(-170/-160 nt)、(-159/-145 nt)分别作定点突变,把每个Sp1一致性序列的第3个碱基胞嘧啶"C"突变为胸腺嘧啶"T",得到突变体MutA(-170/-160 nt)和MutB(-159/-145 nt).使用双荧光素报告基因系统检测这些突变体在宫颈癌Hela细胞、人肾癌OS-RC-2和A549细胞中的转录活性.结果 2个Sp1一致性序列定点突变的启动子重组体在3种肿瘤细胞的转录功能均有显著降低,其中MutA在Hela细胞、OS-RC-2细胞、A549细胞中的活性分别降至突变前启动子活性的79.8
作者:李望;钱国伟;徐为;田卉;李连涛;刘俊杰;陈菲菲;李慧中;章龙珍;郑骏年
来源:中华实验外科杂志 2011 年 28卷 3期