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目的 观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)反义基因重组腺相关病毒载体(rAAV-AsiNOS)对急性完全性脊髓缺血的神经保护作用.方法 采用腹主动脉阻断法建立脊髓缺血模型,应用下传神经源性运动诱发电位对模型进行评估,苏木素-伊红(HE)切片观察缺血对脊髓前角运动神经元的影响,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测单纯缺血各组G24、G48、G72和G120及rAAV-AsiNOS导入各组RG24、RG48、RG72和RG120,iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA在脊髓缺血后不同时间点的表达水平.结果 重组病毒载体rAAV-AsiNOS导入各组与缺血各组比较下传神经源性运动诱发电位,重组病毒组均可以部分恢复,正常脊髓前角运动神经元病理损害程度减轻;RT-PCR检测iNOS,p38MAPK和Caspase-3 mRNA在脊髓缺血中后期不同时间点的表达水平不一致,3种基因在缺血24 h组(G24)和病毒转入组缺血24 h(RG24)相对值分别为0.45和0.25、0.56和0.27、0.50和0.24;在G120和RG120相对值分别为0.53和0.33、0.64和0.25、0.54和0.25,重组病毒载体各组与同时间点缺血组比较均明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 iNOS、p38MAPK和Caspase-3可能共同参与急性脊髓完全性缺血损伤过程;通过抑制iNOS表达,抑制了p38MAPK和Caspase-3表达,从而改善脊髓缺血损伤.

作者:陈春永;叶君健;林建华;陈宣维;林章雄;黄琨

来源:中华实验外科杂志 2011 年 28卷 3期

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作者:
陈春永;叶君健;林建华;陈宣维;林章雄;黄琨
来源:
中华实验外科杂志 2011 年 28卷 3期
标签:
脊髓缺血 诱导性一氧化氮合酶 腺相关病毒载体 Spinal cord ischemia iNOS AAV
目的 观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)反义基因重组腺相关病毒载体(rAAV-AsiNOS)对急性完全性脊髓缺血的神经保护作用.方法 采用腹主动脉阻断法建立脊髓缺血模型,应用下传神经源性运动诱发电位对模型进行评估,苏木素-伊红(HE)切片观察缺血对脊髓前角运动神经元的影响,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测单纯缺血各组G24、G48、G72和G120及rAAV-AsiNOS导入各组RG24、RG48、RG72和RG120,iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA在脊髓缺血后不同时间点的表达水平.结果 重组病毒载体rAAV-AsiNOS导入各组与缺血各组比较下传神经源性运动诱发电位,重组病毒组均可以部分恢复,正常脊髓前角运动神经元病理损害程度减轻;RT-PCR检测iNOS,p38MAPK和Caspase-3 mRNA在脊髓缺血中后期不同时间点的表达水平不一致,3种基因在缺血24 h组(G24)和病毒转入组缺血24 h(RG24)相对值分别为0.45和0.25、0.56和0.27、0.50和0.24;在G120和RG120相对值分别为0.53和0.33、0.64和0.25、0.54和0.25,重组病毒载体各组与同时间点缺血组比较均明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 iNOS、p38MAPK和Caspase-3可能共同参与急性脊髓完全性缺血损伤过程;通过抑制iNOS表达,抑制了p38MAPK和Caspase-3表达,从而改善脊髓缺血损伤.