目的 探讨小分子干扰RNA(siRNA)干扰RhoGDI2基因的表达对结肠癌细胞株凋亡侵袭的影响及其机制.方法 运用Western blot和实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测结肠癌细胞株LoVo、SW480、CaCo2、DLD1、RKO、HT-29的RhoGDI2表达.设计及合成RhoGDI2 siRNA干扰序列,通过LipofectamineTM 2000转染到筛选细胞,细胞分为干扰组和空白对照、阴性对照组；膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,细胞划痕试验和Transwell实验检测细胞迁移能力,Western blot检测上皮间质转化(EMT)相关E-钙黏蛋白(E-cadherin)/波形蛋白(Vimentin)、Snail转录因子表达水平.结果 野生型人结肠癌细胞株RhoGDI2表达量由高到低依次是DLD1、HT29、RKO、CaCo2、LoVo、SW480；LoVo细胞siRNA干扰后RhoGDI2表达抑制率大于70％；干扰组、阴性对照组、空白对照组细胞凋亡率分别是(2.67±0.97)％、(2.45±0.74)％、(2.35±0.43)％(P＞0.05)；干扰组及对照组的细胞划痕24 h愈合度分别是90％、50％ (P ＜0.05)；Transwell实验24 h迁移细胞数目:干扰组为55.7±9.5,阴性对照组和空白对照组分别为25.1 ±8.6、32.3±12.9(P ＜0.05)；siRNA后结肠癌细胞E-cadherin蛋白表达下调,Vimentin蛋白、Snail转录因子表达上调.结论 结肠

作者：李守峰；刘璐；伍衡；许鹤洋；来伟；褚忠华

来源：中华实验外科杂志 2012 年 29卷 10期