目的 观察重组腺病毒介导截短人前列腺特异性膜抗原(tPSMA)基因和小鼠4-1BB配体(m4-1BBL)基因修饰的树突状细胞(DCs)体外诱导抗前列腺癌细胞特异性细胞毒效应.方法 将tPSMA和m4-1BBL克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建重组载体pDC316-tPSMA-IRES-m4-1 BBL,再将其与腺病毒骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染HEK 293细胞,包装成重组腺病毒Ad-tPSMA-IRES-m4-1BBL.将Ad-tPSMA-IRES-m4-1BBL转染C57BL/6小鼠来源的DCs,Western blot法鉴定转染基因表达,流式细胞仪检测DCs细胞表型,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测混合淋巴细胞反应T细胞增殖能力及细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异性杀伤靶细胞活性.结果 成功构建的重组腺病毒pDC316-tPSMA-IRES-m4-1 BBL,tPSMA基因和m4-1BBL基因能正确表达;pDC316-tPSMA-IRES-m4-1BBL转染的DCs高表达人类主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ(87.1±4.7)％、CD80(81.6±5.4)％和CD86(80.1±2.8)％,且刺激同种异体T细胞增殖能力吸光度[(A450=0.61±0.02]明显高于Ad-eGFP转染的DCs组(0.42±0.18)和未转染的DCs组(0.38±0.13) (P＜0.05);pDC316-tPSMA-IRES-m4-1BBL转染的DCs体外诱导明显的CTL特异性杀伤稳定表达tPSMA前列腺癌细胞作用[杀伤率为(53.5±0.1)％].结论 成功制备的pDC316-tPSMA-IRES-m4-1 BBL修

作者：匡幼林；翁小东；刘修恒；陈志远；祝恒成；陈晖

来源：中华实验外科杂志 2012 年 29卷 12期