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目的 探讨白藜芦醇(Res)诱导人脉络膜恶性黑色素瘤细胞Mum2c凋亡及其机制.方法 应用不同浓度的Res(0、4、8、16、32、48 mg/L)处理体外培养Mum2c细胞,24、48、72 h后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖.应用不同浓度的Res(32、40、48 mg/L)处理Mum2c细胞,24h后采用流式细胞仪膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双标法检测细胞凋亡,线粒体膜电位JC-1荧光检测观察细胞凋亡,检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3活性,免疫细胞化学法检测B淋巴细胞/白血病-2(bel-2)表达.结果 CCK-8检测结果显示16 mg/L以上浓度的Res作用24、48、72 h后Mum2c增殖与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测显示.Res(32、40、48 mg/L)作用组凋亡率[(7.00±0.98)%、(11.87 ±0.60)%、(15.39±1.04)%],与阴性对照组[(2.02±0.84)%]比较差异有统计学意义(P<0.05).JC-1荧光显微镜下观察,可见随浓度增加Res作用组低红染色细胞比例[(7.42±0.53)%、(13.12±0.83)%、(15.57±0.53)%]逐渐增加,与阴性对照组[(3.57±0.53)%]比较差异有统计学意义(P<0.05).各Res作用组Caspase-3的吸光度(A)值(0.246±0.015、0.566±0.027、0.778 ±0.018),与阴性对照组(0

作者:李明新;李健;樊伟英

来源:中华实验外科杂志 2012 年 29卷 12期

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作者:
李明新;李健;樊伟英
来源:
中华实验外科杂志 2012 年 29卷 12期
标签:
白藜芦醇 人脉络膜恶性黑色素瘤 细胞凋亡 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 B淋巴细胞/白血病-2 Resveratrol Human choroidal melanoma cell Apoptosis Cysteinyl aspartatespecific protease-3 B lymphocytes/leukemia-2 protein
目的 探讨白藜芦醇(Res)诱导人脉络膜恶性黑色素瘤细胞Mum2c凋亡及其机制.方法 应用不同浓度的Res(0、4、8、16、32、48 mg/L)处理体外培养Mum2c细胞,24、48、72 h后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖.应用不同浓度的Res(32、40、48 mg/L)处理Mum2c细胞,24h后采用流式细胞仪膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双标法检测细胞凋亡,线粒体膜电位JC-1荧光检测观察细胞凋亡,检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3活性,免疫细胞化学法检测B淋巴细胞/白血病-2(bel-2)表达.结果 CCK-8检测结果显示16 mg/L以上浓度的Res作用24、48、72 h后Mum2c增殖与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测显示.Res(32、40、48 mg/L)作用组凋亡率[(7.00±0.98)%、(11.87 ±0.60)%、(15.39±1.04)%],与阴性对照组[(2.02±0.84)%]比较差异有统计学意义(P<0.05).JC-1荧光显微镜下观察,可见随浓度增加Res作用组低红染色细胞比例[(7.42±0.53)%、(13.12±0.83)%、(15.57±0.53)%]逐渐增加,与阴性对照组[(3.57±0.53)%]比较差异有统计学意义(P<0.05).各Res作用组Caspase-3的吸光度(A)值(0.246±0.015、0.566±0.027、0.778 ±0.018),与阴性对照组(0