目的 采用RNA干扰技术(RNAi)技术观察低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对膀胱癌细胞株BIU-87血管内皮生长因子(VEGF)、葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)表达的影响.方法 体外培养人膀胱癌BIU-87细胞,荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测低氧(90%氮气+5%氢气+5%二氧化碳)和常氧下HIF-1α、VEGF、GLUT-1的表达;Western blot检测HIF-1α-siRNA的转染效果及转染前后细胞VEGF、GLUT-1的表达;采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测HIF-1α-siRNA转染后的细胞增殖.结果 低氧8、24 h条件下,BIU-87中HIF-1α蛋白(0.56±0.08、1.33±0.21)、VEGFmRNA (2.12±0.29、3.27±0.46)、VEGF蛋白(0.29±0.04、0.59±0.10)、GLUT-1 mRNA(1.99±0.22、3.95±0.48)、GLUT-1蛋白(0.38±0.05、0.65±0.11)表达均较正常氧条件下HIF-1α蛋白(0.33±0.05)、VEGF mRNA (0.97±0.11)、VEGF蛋白(0.98±0.16)、GLUT-1 mRNA(1.05±0.12)、GLUT-1蛋白(1.46±0.24)表达显著升高(P<0.05),而HIF-1α mRNA在低氧8、24h (1.05±0.09、0.96±0.11)与正常氧(1.16±0.13)条件下差异无统计学意义(P>0.05);HIF-1α-siRNA转染能有效沉默HIF-1α,转染后BIU-87增殖水平(0.63±0.08)与转染前(1.12±0.17)比较明显降低(P<0.05),转染后VEGF mRNA (0.43±0.05)和
作者:刘廷江;孙福振;杨涛;刘学军
来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 1期