目的 运用重组逆转录病毒载体介导白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)和转化生长因子-β1 (TGF-β1),分别和共同体外转染兔膝关节软骨细胞,观察其在关节软骨细胞中的表达及其对软骨细胞生物学性状的影响.方法 构建含有目的基因的表达载体PLNCX2-IL-1Ra-GFP和PLNCX2-TGF-β1-RFP,分别和联合体外转染到兔膝关节软骨细胞,采用NO检测试剂盒检测基因转染对软骨细胞的影响,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中hIL-1Ra和hTGF-β1的表达.结果 成功构建真核表达载体PLNCX2-IL-1Ra-GFP和PLNCX2-TGF-β1-RFP并稳定转染软骨细胞；培养液NO含量检测基因转染组[hIL-1Ra:(92.15±5.36)μmol/L; hTGF-β1:(89.71±5.43) μmol/L;hIL-1Ra+ hTGF-β1:(94.93±4.88) μmol/L]均比空载体组(60.19±4.68)μmol/L和空白组(57.23±4.29) μmol/L高,差异有统计学意义(P＜0.05),基因转染组间差异无统计学意义(P＞0.05),非基因转染组间差异无统计学意义(P＞0.05)；ELISA检测发现基因转染组均有一定量hlL-lRa和hTGF-β1表达,空白组与空载体组均无基因表达,基因转染组与非基因转染组间比较差异有统计学意义(P＜0.05),单基因转染组和联合基因转染组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 逆转录病毒载体PLNCX2介导的IL-1Ra和TGF-β1

作者：向川；刘君；卫小春；耿俊海

来源：中华实验外科杂志 2013 年 30卷 1期