目的 探讨Notch信号特异性阻断剂γ-分泌酶抑制剂DAPT对血管内皮细胞抗过氧化氢(H2O2)损伤的保护作用及机制.方法 分别用不同浓度H2O2(100、200、400 μmol/L)处理体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 2、4、8h,噻唑蓝(MTT)比色法测定内皮细胞活力；Western blot法检测Notch信号通路受体Notch1、线粒体凋亡通路相关蛋白bax及抗凋亡蛋白B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)的表达.H2O2(300 μmol/L)建立HUVECs损伤模型,不同浓度DAPT(40、20、10 μmol/L)与H2O2共同处理HUVECs 2、4、6h,分别检测细胞存活率、黏附能力、凋亡率；Western blot法检测过氧化氢和DAPT共处理的内皮细胞中Notch1、bel-2和bax蛋白的表达.结果 经不同浓度的H2O2(100、200、400 μmol/L)处理内皮细胞2、4、6h后,内皮细胞的存活率明显降低(P＜0.01)；Notch1和bax的表达升高,抗凋亡蛋白bcl-2的表达降低.DAPT能明显提高H2O2损伤的内皮细胞存活率和黏附能力,降低凋亡率(P＜0.01)；经DAPT和H2O2共处理的内皮细胞与过氧化氢损伤组比较,Noteh1和bax蛋白的表达显著降低,但是bcl-2蛋白的表达显著升高(P＜0.01),其中DAPT浓度为10 μmol/L时效果最明显.结论 低浓度DAPT对内皮细胞抗过氧化氢损伤有保护作用,可能与其抗氧化能力和抑制Notch信号通路有关.

作者：杨阳；梁振兴；王宁；段维勋；金振晓；易定华

来源：中华实验外科杂志 2013 年 30卷 5期