目的 构建高尔基磷酸化蛋白-3(GOLPH-3)基因过表达的胰腺癌稳定细胞株BxPC-3,观察GOLPH-3基因过表达对胰腺癌细胞迁移能力的影响.方法 制备逆转录病毒pMSCV-GOLPH-3和pMSCV-vector,并分别感染胰腺癌细胞株BxPC-3,用0.5 mg/L嘌呤霉素筛选得到GOLPH-3过表达及空载对照稳定细胞株.Western blot技术在蛋白水平上检测BxPC-3稳定细胞株中GOLPH-3及β-连环蛋白(β-catenin)的蛋白表达水平,细胞迁移实验(Transwell)检测GOLPH-3对胰腺癌细胞迁移能力的影响.结果 胰腺癌细胞BxPC-3表达GOLPH-3蛋白；空白对照组、空载对照组及过表达组的GOLPH-3蛋白相对含量分别为0.32 ±0.13、0.46 ±0.12、1.02±0.30,过表达组较空载对照组上调50.9％,其差异有统计学意义(P＜0.05).β-catenin蛋白相对含量分别为0.42 ±0.06、0.63±0.34、1.77 ±0.19,与空载对照组比较,上调GOLPH-3能明显促进过表达组β-catenin蛋白的表达,且上调64.4％ (P ＜0.01).每200倍随机计数5个视野下空白对照组、空载对照组、过表达组穿膜胰腺癌细胞数分别为(14.33 ±6.30)个、(16.25±10.45)个、(83.08±62.57)个,过表达组的迁移细胞数明显多于空载对照组(P＜0.001),而两对照组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 上调GOLPH-3能影响胰腺癌细胞的迁移能力,G

作者：张娈景；夏金堂；简卫华；陈连周；刘龙山；李雯；汪谦

来源：中华实验外科杂志 2013 年 30卷 7期