目的 观察小干扰RNA(siRNA)抑制大鼠垂体生长激素腺瘤(GH3)细胞中垂体特异性转录因子-1(Pit-1)基因的表达对其生物学行为的影响.方法 设计合成针对Pit-1基因的siRNA,经脂质体包裹转染GH3细胞.采用Western blot、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测siRNA作用后,Pit-1蛋白和Pit-1 mRNA表达的变化;应用细胞计数试剂盒(CCK-8)进行细胞增殖-毒性检测法检测细胞生长增殖的变化;应用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化;制备Transwell小室测定GH3细胞体外侵袭能力的变化.结果 siRNA显著抑制Pit-1蛋白和mRNA的表达,与阴性对照组比较siRNA组GH3细胞增殖能力降低,36、48 h吸光度(A)值分别减少了0.46、0.41;24、36、48 h凋亡率分别增加了3.17%、6.36%、8.46%;侵袭力减弱,24、36、48 h穿膜细胞数分别减少了38.43、46.54、38.13个,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Pit-1 siRNA能够有效抑制GH3细胞的生长,促进其凋亡,降低侵袭力.
作者:范月超;李锦晓;张慧;熊洪奇;陈洪福
来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 9期