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目的 观察转染Livin反义寡核苷酸(ASODN)对人胆管癌细胞株QBC939细胞Livin mRNA和蛋白表达的抑制作用及其对细胞凋亡的影响.方法 设计合成全硫代磷酸化修饰的Livin ASODN,脂质体介导Livin ASODN转染QBC939细胞,于转染后60h,噻唑蓝(MTT)法检测Livin反义寡核苷酸对QBC939细胞增殖的抑制作用,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染前后Livin mRNA表达的变化;细胞免疫荧光化学检测转染前后Livin蛋白的表达变化;膜联蛋白V(Annexin V)-藻红蛋白(PE)流式细胞仪(FCM)法检测转染后细胞凋亡变化.结果 实验分反义(Livin ASODN)组、错义(Livin NSODN)组、脂质体组、空白对照组.转染后60 h,MTT法显示Livin ASODN组能明显促进胆管癌细胞的凋亡(46.41±1.13、3.10 ±0.44、2.66±0.26、0);RT-PCR显示Livin ASODN组LivinmRNA表达水平明显低于各对照组(54.96 ±3.00、88.31 ±2.50、85.90±0.62、90.36±2.43)(P<0.05);细胞免疫荧光化学法显示Livin ASODN组Livin蛋白表达明显低于各对照组(39.05±2.52、8.60 ±3.60、6.37 ±2.71、0)(P<0.05);流式细胞仪分析结果显示Livin ASODN组的细胞凋亡明显高于各对照组[(36.98±4.09)%、(3.77±0.25)%、(7.51±0.30)%、(6.83±0.23)%].结论 脂质体介导转染Livin ASODN能特

作者:穆宏凌;刘三光;何慧霞;王文斌;刘建华

来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 11期

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作者:
穆宏凌;刘三光;何慧霞;王文斌;刘建华
来源:
中华实验外科杂志 2013 年 30卷 11期
标签:
Livin 反义寡核苷酸 胆管癌 细胞凋亡 Livin Antisense oligodeoxynucleotide Bile duct cancer Cell apoptosis
目的 观察转染Livin反义寡核苷酸(ASODN)对人胆管癌细胞株QBC939细胞Livin mRNA和蛋白表达的抑制作用及其对细胞凋亡的影响.方法 设计合成全硫代磷酸化修饰的Livin ASODN,脂质体介导Livin ASODN转染QBC939细胞,于转染后60h,噻唑蓝(MTT)法检测Livin反义寡核苷酸对QBC939细胞增殖的抑制作用,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染前后Livin mRNA表达的变化;细胞免疫荧光化学检测转染前后Livin蛋白的表达变化;膜联蛋白V(Annexin V)-藻红蛋白(PE)流式细胞仪(FCM)法检测转染后细胞凋亡变化.结果 实验分反义(Livin ASODN)组、错义(Livin NSODN)组、脂质体组、空白对照组.转染后60 h,MTT法显示Livin ASODN组能明显促进胆管癌细胞的凋亡(46.41±1.13、3.10 ±0.44、2.66±0.26、0);RT-PCR显示Livin ASODN组LivinmRNA表达水平明显低于各对照组(54.96 ±3.00、88.31 ±2.50、85.90±0.62、90.36±2.43)(P<0.05);细胞免疫荧光化学法显示Livin ASODN组Livin蛋白表达明显低于各对照组(39.05±2.52、8.60 ±3.60、6.37 ±2.71、0)(P<0.05);流式细胞仪分析结果显示Livin ASODN组的细胞凋亡明显高于各对照组[(36.98±4.09)%、(3.77±0.25)%、(7.51±0.30)%、(6.83±0.23)%].结论 脂质体介导转染Livin ASODN能特