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目的 观察基因转染后高表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的树突细胞(DC)及色氨酸代谢产物(TC)对CD4+T细胞增殖的抑制作用.方法 将IDO基因转染小鼠DC,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及免疫细胞化学检测IDO表达.设DC、空转染DC、转染DC、转染DC+1-甲基色氨酸(1-MT)、DC +TC、转染DC+ TC 6组,混合淋巴细胞培养检测各组对同种异系CD4+T细胞增殖的影响.结果 转染组IDO mRNA表达水平(0.1550±0.0124)较DC组(0.1197±0.0463)及空转染组(0.1152±0.0260)显著增高(P<0.05).免疫细胞化学检测显示转染DC胞质内出现阳性染色.转染组刺激指数(SI)(2.8640±0.1459)较DC组(3.3040±0.2394)及空转染组(3.2340±0.1862)显著降低(P<0.05).转染DC+1-MT组SI(3.1900±0.2906)与DC组及空转染组差异无统计学意义(P>0.05).转染DC+ TC组中犬尿氨酸(KYN)、3-羟基犬尿氨酸(3-HK)、3-羟邻氨基苯甲酸(3-HAA)的最小有效抑制浓度(分别为100、100和50 μmol/L)较DC+ TC组(分别为200、200和100 μmol/L)明显降低.在最小有效抑制浓度下,转染DC+ TC组SI(分别为2.4930±0.1555、2.4924±0.1737、2.4662±0.2482)较转染组显著降低(P<0.05).结论 转染DC可表达有功能的IDO.转染DC与TC可协同抑制CD4+T细胞增殖.

作者:戴向晨;鲁猛;罗宇东;刘彤;朱理玮;王鹏志

来源:中华实验外科杂志 2013 年 30卷 11期

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作者:
戴向晨;鲁猛;罗宇东;刘彤;朱理玮;王鹏志
来源:
中华实验外科杂志 2013 年 30卷 11期
标签:
吲哚胺2,3双加氧酶 pEGFP-N1-IDO质粒 色氨酸代谢产物 树突状细胞 Indoleamine 2,3 dioxygenase Vector pEGFP-N1-IDO Tryptophan catabolites Dendritic cells
目的 观察基因转染后高表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的树突细胞(DC)及色氨酸代谢产物(TC)对CD4+T细胞增殖的抑制作用.方法 将IDO基因转染小鼠DC,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及免疫细胞化学检测IDO表达.设DC、空转染DC、转染DC、转染DC+1-甲基色氨酸(1-MT)、DC +TC、转染DC+ TC 6组,混合淋巴细胞培养检测各组对同种异系CD4+T细胞增殖的影响.结果 转染组IDO mRNA表达水平(0.1550±0.0124)较DC组(0.1197±0.0463)及空转染组(0.1152±0.0260)显著增高(P<0.05).免疫细胞化学检测显示转染DC胞质内出现阳性染色.转染组刺激指数(SI)(2.8640±0.1459)较DC组(3.3040±0.2394)及空转染组(3.2340±0.1862)显著降低(P<0.05).转染DC+1-MT组SI(3.1900±0.2906)与DC组及空转染组差异无统计学意义(P>0.05).转染DC+ TC组中犬尿氨酸(KYN)、3-羟基犬尿氨酸(3-HK)、3-羟邻氨基苯甲酸(3-HAA)的最小有效抑制浓度(分别为100、100和50 μmol/L)较DC+ TC组(分别为200、200和100 μmol/L)明显降低.在最小有效抑制浓度下,转染DC+ TC组SI(分别为2.4930±0.1555、2.4924±0.1737、2.4662±0.2482)较转染组显著降低(P<0.05).结论 转染DC可表达有功能的IDO.转染DC与TC可协同抑制CD4+T细胞增殖.