目的 建立骨髓间充质干细胞(BMSCs)与枯否细胞(KCs)的体外共培养体系,并观察BMSCs对KCs表型的影响,为BMSCs在肝脏移植中的应用提供依据.方法 建立KCs与BMSCs(1:1)直接接触共培养体系作为实验组,单独培养KCs为对照组.两组细胞均加入内毒素(LPS,1 mg/L),培养24h后,应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法及Western blot法检测白细胞介素(IL)-10基因及蛋白的表达、酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞IL-10、前列腺素E2(PGE2)、IL-6分泌量、流式细胞仪检测人类主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ、CD40、CD80、CD86表达.结果 Real-time PCR及Western blot检测结果显示,与对照组比较,共培养体系能明显增加IL-10基因和蛋白质的表达(P＜0.05).LPS刺激后,共培养组IL-10分泌量(2 307.44±308.97) ng/L与PGE2分泌量(424.48 ±47.86) ng/L均比对照组高[IL-10:(1 000.12±49.06) ng/L;PGE2:(244.48 ±28.15) ng/L,P ＜0.01]；IL-6分泌量低于对照组[BMSCs+ KCs:(78.14±10.58) ng/L;KCs:(283.18 ±20.50)ng/L,P＜0.01].流式细胞细胞仪检测显示,LPS刺激24h后,与对照组高表达MHCⅡ(99.80％)、CD40(99.26％)、CD80(99.93％)及CD86(99.92％)比较,共培养组MHCⅡ (95.18％)、CD40(89.92％)、CD80(99.89％)、CD86(94.75％)表达

作者：张继勤；刘作金；李钺；杨慷；陈玉培

来源：中华实验外科杂志 2014 年 31卷 1期