目的 观察沉默S期激酶相关蛋白2(Skp2)基因对细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白27(P27KiP1)、第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因(PTEN)的表达调控及对膀胱癌细胞生长活性的影响,探讨其在肿瘤侵袭、凋亡中的作用机制.方法 采用Western blot法检测经腺病毒载体(Ad-Skp2)转染后膀胱癌细胞株EJ的Skp2、P27kip1和PTEN的表达改变;用细胞划痕实验、Boyden小室体外侵袭实验、吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)荧光染色法、噻唑蓝(MTT)比色法反映转染后细胞迁移力、外侵袭力、凋亡及生长活性的变化.结果 转染后48 h的膀胱癌EJ细胞,Skp2蛋白表达开始下降,以转染后96 h最明显;而P27kiP1和PTEN在转染96 h后,表达显著增加(P＜0.05);转染后的EJ细胞体外侵袭力下降[(11.7±1.2)％比(69.5±1.4)％,P＜0.05],迁移能力减弱(P＜0.05),细胞凋亡增多(11.8％比45.6％,P＜0.05),生长活性降低(P＜0.05).结论 膀胱癌细胞中的Skp2表达下调可能通过负向调控P27kipl、PTEN而影响癌细胞的分裂周期,从而使癌细胞衰老,最终诱导凋亡.
作者：张士龙；丁德刚；张祥生；单磊；刘中华
来源：中华实验外科杂志 2014 年 31卷 2期
