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目的 观察黑色素瘤抗原A3(MAGE-A3)基因过表达对人肝癌细胞株增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响,探讨MAGE-A3基因在肝细胞癌发生发展过程中的作用.方法 将MAGE-A3重组慢病毒表达载体(LV-MAGE-A3)感染人肝癌细胞株HepG2和MHCC-97H;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测MAGE-A3 mRNA和蛋白在肝癌细胞中的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)、平板克隆形成实验、Transwell迁移及侵袭实验检测MAGE-A3基因过表达前后肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力的变化;原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记DNA链断端分析法(TUNEL)检测肝癌细胞的凋亡,流式细胞术(FCM)分析细胞周期的改变.结果 病毒感染肝癌细胞120 h荧光达到最强且稳定,感染效率可达80%.RT-PCR和Western blot检测证实经LV-MAGE-A3感染的细胞高效表达MAGE-A3 mRNA与蛋白.HepG2和MHCC-97H细胞经LV-MAGE-A3感染后,迁移细胞数达到(187.00±13.52)、(121.00 ±4.16)个,侵袭细胞数达到(164.00±9.64)、(59.50±1.00)个,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);FCM检测发现S期细胞比例增加,G1期细胞减少.肝癌细胞的生长增殖、克隆形成能力和凋亡指数在各组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 MAGE-A3基因的过表达能提高肝癌细胞的迁移和侵袭能力,提示MAGE-A3基因与肝细

作者:林青;陈裕庆;张永俊;黄爱民;张文敏

来源:中华实验外科杂志 2014 年 31卷 4期

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作者:
林青;陈裕庆;张永俊;黄爱民;张文敏
来源:
中华实验外科杂志 2014 年 31卷 4期
标签:
黑色素瘤抗原 癌,肝细胞 迁移 侵袭 Melanoma antigen gene Hepatocelluar carcinoma Migration Invasion
目的 观察黑色素瘤抗原A3(MAGE-A3)基因过表达对人肝癌细胞株增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响,探讨MAGE-A3基因在肝细胞癌发生发展过程中的作用.方法 将MAGE-A3重组慢病毒表达载体(LV-MAGE-A3)感染人肝癌细胞株HepG2和MHCC-97H;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测MAGE-A3 mRNA和蛋白在肝癌细胞中的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)、平板克隆形成实验、Transwell迁移及侵袭实验检测MAGE-A3基因过表达前后肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力的变化;原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记DNA链断端分析法(TUNEL)检测肝癌细胞的凋亡,流式细胞术(FCM)分析细胞周期的改变.结果 病毒感染肝癌细胞120 h荧光达到最强且稳定,感染效率可达80%.RT-PCR和Western blot检测证实经LV-MAGE-A3感染的细胞高效表达MAGE-A3 mRNA与蛋白.HepG2和MHCC-97H细胞经LV-MAGE-A3感染后,迁移细胞数达到(187.00±13.52)、(121.00 ±4.16)个,侵袭细胞数达到(164.00±9.64)、(59.50±1.00)个,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);FCM检测发现S期细胞比例增加,G1期细胞减少.肝癌细胞的生长增殖、克隆形成能力和凋亡指数在各组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 MAGE-A3基因的过表达能提高肝癌细胞的迁移和侵袭能力,提示MAGE-A3基因与肝细