目的 观察Notch1基因对前列腺癌细胞增殖和周期的影响.方法 在前列腺癌细胞PC-3中转染Notch1-ORF质粒,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测Notch1和细胞核增殖抗原(Ki-67)的表达.以四唑氮化合物(MTS)试剂(每孔20μl)加入细胞,检测490 nm处吸光度(A)值评价细胞增殖能力.以碘化丙锭反应液1ml染色细胞,流式细胞仪检测细胞周期的变化.结果 实验组Notch1基因表达水平为43.740±6.438,明显高于阴性对照组(3.574±0.368)和空白对照组(3.306±0.278);同时实验组Ki-67的表达减低,实验组为0.576±0.063,阴性对照组为1.012±0.011,空白对照组为1.000±0.007 (P<0.01).MTS实验中实验组细胞在24、48、72 h的A值均低于两对照组细胞(P<0.01).实验组G0/G1期比例为(64.013±1.952)%,明显高于阴性对照组的(48.917 ±2.771)%和空白对照组的(51.317±1.907)%,差异有统计学意义(P<0.01).结论 前列腺癌细胞中Notch1的表达可以促使细胞发生G0/G1期阻滞,抑制细胞增殖能力,这种抑制作用可能是通过Notch1负性调节Ki-67的表达实现的.
作者:司马晋;张保;杨素霞;王保军;张帆;张旭
来源:中华实验外科杂志 2014 年 31卷 6期