目的 观察腺病毒介导S24F基因转染人脐静脉内皮细胞(HUVECs)对调节活化正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)趋化作用的影响.方法 构建pAV-MCMV/S24F-GFP-3 FLAG(Ad-S24F)腺病毒载体,将不含目的基因的病毒载体pAV-MCMV-GFP (Ad-Null)为阴性对照组.分离培养HUVECs后分别转染Ad-S24F和Ad-Null,另设不含腺病毒培养基为空白对照.转染后采用荧光显微镜及Western blot检测重组蛋白表达.采用Transwell小室法分析S24F对RANTES趋化作用的影响.结果 Ad-S24F及Ad-Null构建成功,转染HUVECs后荧光显微镜及Western blot能检测到重组蛋白表达,Ad-S24F转染后能够抑制RANTES诱导的外周血单个核细胞(PBMCs)穿透内皮[Ad-S24F:(9.20 ±0.02)%;Ad-Null:(17.70±0.02)%;空白对照组(15.10±0.01)%]的趋化作用.结论 腺病毒介导S24F基因转染HUVECs能够抑制RANTES的趋化作用.
作者:孙永丰;冯剑锷;史嘉玮;董念国
来源:中华实验外科杂志 2014 年 31卷 8期