目的 下调人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel耐药相关基因三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达,检测其生物学特性的改变.方法 采用中等浓度0.08 mg/L、间歇作用法建立人乳腺癌多西他赛耐药细胞株BT549/Docetaxel,构建ABCG2的pRNAT-U6.2/Lenti小干扰RNA(siRNA)表达载体转染BT549/Docetaxel,采用噻唑蓝(MTT)法测定转染前后细胞的耐药指数,高效液相色谱测定细胞内多西他赛的浓度.结果 感染ABCG2si2、ABCG2si1、ABCG2siC后的BT549/Docetaxel细胞与未感染的BT549/Docetaxel细胞ABCG2mRNA与β-actin比较其相对表达水平分别为0.11 ±0.02、0.26 ±0.01、0.88±0.03、0.92±0.02.感染ABCG2si1、ABCG2si2的细胞内ABCG2的表达减少,与对照ABCG2siC、BT549/Docetaxel比较差异有统计学意义(P＜0.05),分别下降了71.7％和88.0％.4种细胞经Western blot检测显示,ABCG2蛋白表达水平不同,ABCG2si1、ABCG2si2对该蛋白的表达均有抑制作用,其中后者效果显著(P＜0.05).经MTT法检测,感染有ABCG2si2、ABCG2siC的细胞与未感染的BT549/Docetaxel细胞对Docetaxel的半数抑制剂量(IC50)分别是:31.12、69.55、76.21 mg/L,其耐药指数分别为:8.13、18.16、19.90.其中前者与后两者比较对Docetaxel的敏感性显著增加(P

作者：李文涛；邓萌；翟保平；孙文聪；王磊；丁超；贾琳娇；刘秋荣；张斌

来源：中华实验外科杂志 2014 年 31卷 8期