目的 观察细胞增殖抑制基因(HSG)对大鼠肝星状细胞系HSC-T6增殖与凋亡的影响.方法 制备携带HSG基因的重组腺病毒载体,瞬时转染至大鼠肝星状细胞HSC-T6,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测细胞中HSG信使核糖核酸(mRNA)及蛋白的表达水平,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖活性,流式细胞术分析HSG对细胞周期和凋亡状态的影响,Western blot检测HSG对细胞周期蛋白激酶抑制剂p21、p27及细胞增殖核抗原(PCNA)的作用.结果 与空白对照组和阴性对照组比较,转染组HSG的mRNA(14.93 ±1.10比1.03±0.33,14.93±1.10比1.00 ±0.15)和蛋白表达量明显增加(P<0.05);转染后细胞生长减缓,细胞增殖活性明显受到抑制(P<0.05);转染组G0/G1期细胞比例和凋亡率分别为[(66.57±1.29)%、(23.88 ±0.96)%],与空白对照组[(49.32±2.86)%、(3.38±0.16)%]和阴性对照组[(52.46±3.17)%、(3.54±0.24)%]比较明显增高(P<0.05);转染后细胞周期调控蛋白p21、p27表达升高,PCNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 HSG基因过表达可有效的抑制大鼠肝星状细胞系HSC-T6的增殖,使其阻滞于G0/G1期并诱导其凋亡,并可能是通过参与细胞周期的调节发挥作用.
作者:吴潇;林泽宇;陈治平;翁杰;杨青壮;万云乐;陈涛;贾长库
来源:中华实验外科杂志 2014 年 31卷 10期