目的 观察金属硫蛋白-3(MT-3)表达对A549肺癌细胞株的增殖、凋亡和生物学功能的影响.方法 应用基因转录方法检测MT-3表达对A549肺癌细胞株的抗增殖作用和生物学功能的影响;通过免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测MT-3 mRNA在A549肺癌株中的表达水平,半定量RT-PCR(SqRT-PCR)测定转染后A549肺癌细胞中c-fos、c-jun mRNA水平表达变化,并通过显微镜、苏木素-伊红(HE)染色、透射电镜等观察凋亡细胞的形态学改变.结果 RT-PCR和免疫细胞化学证实转染后A549肺癌细胞中有MT-3稳定表达;SqRT-PCR证实转染后A549肺癌细胞中c-fos、c-jun mRNA水平显著降低(x2=2.536,P<0.05).噻唑蓝(MTT)比色法表明随着MT-3与肺癌细胞效靶比增加及作用时间延长,抑制率明显增强(x2=2.795,P<0.05).MT-3作用于肺癌细胞24 h后,形态学观察肺癌细胞发生凋亡或坏死.结论 体外制备的MT-3对肺癌A549细胞具有抑制增殖和促进凋亡作用,其可能是通过负性调控信号通路降低A549肺癌细胞株中c-fos、c-jun的表达.
作者:陈重;魏立;务森;张宁;朱晓明;陈明耀
来源:中华实验外科杂志 2014 年 31卷 10期